Na vasta rede de interações que constituem os ecossistemas agrícolas, o fungo Botrytis cinerea está a emergir como inimigo dos agricultores e dos produtos de todo o mundo. Popularmente conhecido como fungo da podridão cinzenta, este patogéneo filamentoso causa estragos numa grande variedade de culturas, desde frutas e legumes a plantas ornamentais. Neste post de blog, iremos explorar em detalhe os principais aspetos relacionados com o Botrytis: desde a sua biologia e ciclo de vida, passando pelos danos que causa, os sintomas que causa, os hospedeiros que afeta, os desafios relacionados com o desenvolvimento de resistência, até às estratégias de tratamento e controlo disponíveis para mitigar o seu impacto na agricultura.

# # # Biologia e Ciclo de Vida de Botrytis cinerea # # #
O Botrytis cinerea é um fungo ascomiceta pertencente à família Sclerotiniaceae. É uma espécie saprófita (alimenta-se de material vegetal morto) comummente encontrada no solo e em material vegetal em decomposição. Apesar da sua natureza saprofítica, a Botrytis cinerea é também um patogénico oportunista capaz de infetar uma vasta gama de plantas, especialmente em condições de elevada humidade e temperaturas moderadas.
O ciclo de vida da Botrytis cinerea é complexo e inclui reprodução assexuada e sexuada. Sob condições favoráveis de humidade e temperatura, durante a sua fase assexuada, a Botrytis cinerea produz esporos assexuados conhecidos como conídios. Estes conídios são pequenos, unicelulares e estão contidos em estruturas especializadas denominadas conidióforos. Os conidióforos são ramos do micélio que emergem de lesões em plantas infetadas e libertam conídios para o ambiente, onde podem ser transportados pelo vento ou pela água para novas plantas hospedeiras (dando-lhes aquele aspeto difuso). Uma vez dentro da planta, o fungo desenvolve-se e produz novas estruturas conidiais, que por sua vez geram mais infeções secundárias.

Na fase sexual e em condições desfavoráveis como a seca ou o frio, a Botrytis produz estruturas reprodutoras complexas denominadas escleródios. Os escleródios são estruturas duras, de cor escura e altamente resistentes que permitem a sobrevivência a longo prazo. Estes escleródios podem persistir no solo ou em tecidos vegetais mortos durante longos períodos e servir como fonte de inóculo para futuras infeções.
Os escleródios contêm células sexuais denominadas ascósporos. Estes ascósporos são libertados para o ambiente quando os escleródios se decompõem, contribuindo para a dispersão e disseminação do fungo.
# # # Condições Ambientais # # #
Temperatura: A Botrytis cinerea prospera a temperaturas moderadas, com uma gama de crescimento ideal entre 15°C e 25°C. No entanto, pode sobreviver e crescer numa gama mais ampla de temperaturas, desde 0°C até aproximadamente 35°C. As temperaturas mais baixas atrasam o crescimento do fungo, enquanto as temperaturas mais elevadas podem promover a esporulação e a propagação da doença.
Comportamento do Botrytis em relação à temperatura:
Formação de esclerot: 11°C – 15°C.
Germinação: 20°C – 25°C.
Desenvolvimento ótimo: 18°C - 23°C.
Crescimento: 0°C - 35°C.
Humidade relativa: A humidade relativa do ar é um fator crucial para o desenvolvimento de Botrytis cinerea. A doença tende a ser mais grave em condições de humidade elevada, principalmente quando a humidade relativa ultrapassa os 90%, sendo 95% a humidade ideal. A formação de gotículas de água na superfície das plantas ou no solo pode aumentar a incidência da doença por proporcionar um ambiente favorável ao crescimento do fungo.
Humidificação Foliar: A humectação foliar, como o orvalho ou a chuva, pode favorecer a germinação dos esporos de Botrytis cinerea e a penetração do fungo nos tecidos vegetais. Por isso, as plantas que permanecem húmidas por longos períodos são mais suscetíveis à infeção.
# # # Danos e sintomas: como identificar infeções causadas por Botrytis cinerea # # #
Os danos causados por Botrytis cinerea podem ser devastadores para as culturas agrícolas e podem manifestar-se de diversas formas, dependendo do hospedeiro e das condições ambientais. Abaixo estão alguns dos sintomas mais comuns associados à infeção por Botrytis.:
Folhas
A podridão cinzenta é o sintoma mais característico da infeção por Botrytis cinerea e o principal sinal da sua presença. Manifesta-se inicialmente como manchas aquosas na parte inferior das folhas, perto das extremidades, que rapidamente se alongam até ficarem castanhas e cobertas de bolor acinzentado. Com o tempo, as lesões expandem-se e tornam-se moles e viscosas, levando à rutura completa do tecido afetado.

Caules
A Botrytis pode desenvolver manchas necróticas em caules infetados. Estas lesões começam geralmente como pequenas manchas castanhas claras que podem crescer e fundir-se para formar áreas maiores de tecido morto. Tal como nas folhas, o crescimento de fungos acinzentados pode ser observado nos caules infectados. Este bolor cinzento é a característica típica da presença de Botrytis cinerea. À medida que a infecção progride, os caules afectados podem começar a murchar e a apodrecer, o que enfraquece a planta, afectando a sua capacidade de transportar água e nutrientes.

Flores e botões a murchar
A Botrytis cinerea pode infetar flores e botões, fazendo com que murchem prematuramente. Este sintoma afecta significativamente o rendimento e a qualidade das culturas, provocando reduções significativas na produção..

Decomposição de frutas e legumes
Nas frutas e legumes armazenados, a Botrytis cinerea pode provocar decomposição dos tecidos como consequência da enorme quantidade de enzimas que segrega no tecido infetado com atividades líticas, daí o aspeto aquoso nos pontos de infeção.

# # # Quem infeta a Botrytis cinerea? # # #
A Botrytis cinerea não discrimina culturas e pode afetar uma grande variedade de plantas, incluindo frutas, legumes, cereais, leguminosas, plantas ornamentais e lenhosas. Alguns dos hospedeiros mais comuns do Botrytis cinerea incluem:
Fruta
Uvas: Botrytis cinerea é especialmente problemática em vinhas, onde pode causar apodrecimento nos cachos de uvas, reduzindo o rendimento e a qualidade do vinho.
Morangos: Os morangos são suscetíveis à infeção por Botrytis cinerea, especialmente durante períodos de elevada humidade e chuva.
Framboesas: As framboesas são vulneráveis à podridão cinzenta, que pode afetar os frutos no campo e durante o armazenamento.
Vegetais
Tomate: Botrytis cinerea pode infetar frutos de tomate, bem como folhas e caules, causando danos significativos nas culturas.
Pimentos: Os pimentos são suscetíveis à infeção por Botrytis cinerea, que pode causar o apodrecimento dos frutos e o murchamento das plantas.
Alface: A alface pode ser afetada pela Botrytis cinerea, especialmente em condições de elevada humidade e fraca circulação de ar.
Plantas Ornamentais
Rosas: Botrytis cinerea pode infetar os botões de rosa, fazendo com que murchem prematuramente e reduzindo a qualidade das flores.
Crisântemos: Os crisântemos são suscetíveis à infeção por Botrytis cinerea, que pode provocar o apodrecimento do caule e das folhas.
Gérberas: As gerberas podem ser afetadas pela podridão cinzenta, o que pode reduzir a longevidade das flores e afetar a sua comercialização.
# # # Tratamentos e estratégias de controlo de Botrytis cinerea # # #
A gestão integrada de pragas e doenças é essencial para controlar eficazmente a Botrytis cinerea. De seguida, contamos algumas estratégias de tratamento e controlo que podem ajudar a mitigar o impacto da doença:
Práticas Culturais
Ø Promoção da Circulação de Ar: Manter uma boa circulação de ar em redor das plantas pode ajudar a reduzir a humidade na superfície das folhas e dos frutos, o que, por sua vez, reduz a incidência de Botrytis cinerea.
Ø Remoção de material vegetal infetado: A remoção atempada do material vegetal infetado pode ajudar a prevenir a propagação da doença e a reduzir a quantidade de inóculo disponível para novas infeções.
Ø Evite a humidade excessiva: Evitar a rega excessiva e proporcionar uma drenagem adequada do solo pode ajudar a reduzir a humidade ambiente, o que dificulta o desenvolvimento e a propagação do Botrytis cinerea.
Ø Densidade de plantação: A densidade de plantação também pode influenciar a incidência de Botrytis cinerea. As plantas próximas umas das outras podem apresentar má circulação de ar e maior humidade relativa, o que estimula o desenvolvimento de fungos. Por isso, espaçar as plantas adequadamente pode ajudar a reduzir o risco de infeção.
Uso de fungicidas
Ø Seleção do tratamento adequado
Inibidores da síntese de ergosterol: compreendem quatro grupos de fungicidas: Triazóis Aminas, Hidroxianilidas e Tiocarbamato que afetam a biossíntese de ergosterol nas células do patogéneo.
Inibidores da síntese de aminoácidos e proteínas: inclui Ciprodinil, Pirimetanil e Mepanipirim.
Inibidor externo da quinona: Inibe a transferência de eletrões no sítio Qo no complexo mitocondrial III.
Inibidores da succinato desidrogenase: incluem moléculas como Boscalid, Floupyram e Fluxapyroxad. Afetam a enzima succinato desidrogenase, na via metabólica da respiração.
Atividade química multissítio: Possui vários mecanismos de ação, pois pode interferir com diferentes organelos e processos fisiológicos nas células fúngicas em simultâneo, incluindo: Folpet, Captan, Enxofre, entre outros.
Ø Rotação de produtos: A rotação do uso de fungicidas com diferentes modos de ação pode ajudar a prevenir o desenvolvimento de resistência em populações de Botrytis cinerea. É importante alternar entre diferentes classes de fungicidas e não depender excessivamente de um único produto químico.
Ø Aplicação preventiva: a aplicação preventiva de fungicidas, antes de surgirem os sintomas da doença, pode ajudar a proteger as culturas contra a infeção por Botrytis cinerea. É importante seguir as recomendações de dosagem e frequência de aplicação especificadas no rótulo do produto.
Agentes de biocontrolo
Consiste na utilização de microrganismos e extratos orgânicos que costumam colonizar as feridas dos tecidos vegetais utilizando todos os nutrientes disponíveis, o que dificulta a germinação dos esporos de outros organismos patogénicos.
Ø Trichoderma spp.: Algumas espécies de Trichoderma, como Trichoderma harzianum e Trichoderma atroviride, são conhecidas pela sua capacidade de colonizar o solo e os tecidos vegetais, competindo com a Botrytis cinerea por recursos e espaço. Além disso, estes fungos podem produzir enzimas que degradam as paredes celulares do fungo patogénico, interferindo com o seu crescimento e disseminação.
Ø Bacillus spp.: Algumas espécies de bactérias do género Bacillus, como o Bacillus subtilis e o Bacillus amyloliquefaciens, produzem compostos antimicrobianos que podem inibir o crescimento de Botrytis cinerea. Estas bactérias podem também colonizar a superfície das plantas, formando uma camada protetora que dificulta a entrada do fungo patogénico.
Ø Gliocladium spp.: As espécies de Gliocladium, como o Gliocladium roseum, são fungos antagonistas que podem competir com o Botrytis cinerea por espaço e nutrientes. Além disso, algumas estirpes de Gliocladium spp. Produzem metabolitos antifúngicos que podem inibir o crescimento do patogéneo.
Ø Pseudomonas spp.: Algumas estirpes de bactérias do género Pseudomonas, como a Pseudomonas fluorescens, produzem metabolitos antibióticos e enzimas que podem inibir o crescimento de Botrytis cinerea. Estas bactérias podem também induzir uma resposta
# # # Desenvolvimento da resistência e desafios no controlo de Botrytis cinerea # # #
Um dos principais desafios na gestão de Botrytis cinerea é o desenvolvimento de resistência aos fungicidas. O uso excessivo e contínuo de fungicidas levou ao desenvolvimento de estirpes de Botrytis cinerea resistentes a múltiplas classes de produtos químicos. Além disso, a pressão contínua e a proibição de alguns fungicidas estão a conduzir ao aparecimento de resistência.
Estas resistências representam um grande desafio para o controlo da doença, pois limitam a eficácia dos tratamentos convencionais e aumentam a dificuldade de controlo da doença. Para resolver este problema, é essencial implementar estratégias integradas de gestão de pragas e doenças que reduzam a pressão de selecção sobre as populações de fungos e promovam a diversidade genética nas populações de agentes patogénicos.
As principais causas do aparecimento de resistência na Botrytis são:
Utilização excessiva ou inadequada de produtos fitossanitários: A aplicação frequente e repetida do mesmo produto fitossanitário ou a utilização de doses subletais pode selecionar populações de fungos resistentes.
Monoculturas e práticas agrícolas intensivas: Os sistemas agrícolas que dependem fortemente das monoculturas e das práticas agrícolas intensivas podem aumentar a pressão selectiva para a resistência aos produtos fitossanitários.
Falta de rotação dos modos de ação: Se forem utilizados produtos químicos com o mesmo modo de ação, de forma constante, isto pode estimular o desenvolvimento de resistência nas populações de fungos.
Capacidade de adaptação rápida: Botrytis cinerea possui uma elevada capacidade de adaptação e desenvolvimento de resistência a fungicidas devido à sua variabilidade genética e capacidade de gerar mutações.
Transferência horizontal de genes de resistência: A transferência horizontal de genes de resistência a fungicidas entre diferentes populações de fungos ou mesmo entre espécies pode contribuir para o desenvolvimento e disseminação da resistência.
Mecanismos de resistência: A Botrytis cinerea pode desenvolver uma variedade de mecanismos de resistência aos fungicidas, como a sobreexpressão de genes de desintoxicação, a redução da acumulação de fungicidas no interior da célula e a alteração dos locais de ação dos fungicidas.
Tolerância a doses subletais: As populações de Botrytis cinerea podem desenvolver tolerância a doses subletais de fungicidas, o que pode permitir a sua sobrevivência e reprodução na presença do fungicida.
Gestão inadequada da resistência: A não implementação de práticas de gestão da resistência, tais como modos de acção rotativos, aplicação de fungicidas em misturas ou sequências e utilização de estratégias integradas de controlo de pragas, pode contribuir para o desenvolvimento e propagação da resistência.
Como podemos evitá-lo:
Rotação de fungicidas: Alternar entre diferentes grupos químicos de fungicidas para evitar a pressão seletiva contínua sobre a população de Botrytis cinerea.
Utilização de fungicidas em mistura ou em sequência: A combinação de diferentes fungicidas com diferentes modos de ação ou a alternância entre eles em sequência pode reduzir a probabilidade de aparecimento de estirpes resistentes.
Monitorização e deteção precoce de resistência: Realizar ensaios de sensibilidade a fungicidas em populações de Botrytis cinerea para detetar a presença de estirpes resistentes e ajustar as estratégias de gestão em conformidade.
Utilização integrada de estratégias de controlo: Implementar práticas integradas de gestão de pragas que incluam medidas preventivas, culturais, biológicas e químicas para reduzir a pressão selectiva sobre a população de Botrytis cinerea e minimizar o risco de resistência.
Promoção da biodiversidade: Incentivar a diversidade genética de Botrytis cinerea no ambiente agrícola através da conservação dos habitats naturais, da rotação de culturas e da promoção de sistemas agrícolas sustentáveis pode ajudar a reduzir a selecção de estirpes resistentes.
Educação e formação: Fornecer educação e formação aos agricultores sobre práticas integradas de gestão de pragas e a utilização adequada de fungicidas pode contribuir para uma aplicação mais eficaz e responsável dos produtos fitofarmacêuticos.
# # # Análise de resistência in vitro: importância e benefícios # # #
As análises de resistência in vitro desempenham um papel crucial na gestão e controlo de agentes patogénicos como a Botrytis cinerea na agricultura. Estes testes permitem aos investigadores e agricultores avaliar a sensibilidade das populações de agentes patogénicos a diferentes classes de fungicidas, identificar estirpes resistentes e desenvolver estratégias de gestão mais eficazes. Nesta secção, iremos explorar a importância e os benefícios da análise de resistência in vitro no contexto do controlo de Botrytis cinerea.
Importância da Análise de Resistência In Vitro
Detetar resistência emergente: As análises de resistência in vitro permitem a deteção precoce da presença de estirpes de Botrytis cinerea resistentes a fungicidas específicos. Isto é crucial para prevenir a propagação da resistência e tomar medidas preventivas antes que a resistência se torne um problema generalizado.
Avaliar a eficácia dos fungicidas: As análises de resistência in vitro fornecem informações precisas sobre a eficácia de diferentes fungicidas contra populações de Botrytis cinerea. Isto permite aos agricultores seleccionar os produtos mais eficazes para o controlo de doenças e optimizar a utilização dos recursos disponíveis.
Desenvolver Estratégias de Gestão Integrada: Conhecer o perfil de sensibilidade das populações de Botrytis cinerea aos fungicidas permite aos investigadores e agricultores desenvolver estratégias de gestão integradas que combinem diferentes métodos de controlo, tais como práticas culturais, utilização de fungicidas e biocontrolo, para reduzir a pressão de seleção e prevenir o desenvolvimento de resistência.

Benefícios da Análise de Resistência In Vitro
Custos e perdas reduzidos: Ao identificar precocemente estirpes resistentes de Botrytis cinerea, os testes de resistência in vitro ajudam a evitar a utilização desnecessária de fungicidas ineficazes, reduzindo os custos de produção e minimizando as perdas económicas associadas à doença.
Otimizar a utilização de fungicidas: Ao conhecer a sensibilidade das populações de Botrytis cinerea a diferentes fungicidas, os agricultores podem selecionar e alternar os produtos de forma mais eficaz, prolongando a vida útil dos fungicidas e reduzindo o risco de desenvolvimento de resistência.
Melhorar a eficácia do controlo: Os testes de resistência in vitro permitem aos agricultores ajustar as suas estratégias de controlo, melhorando a eficácia do controlo da Botrytis cinerea e reduzindo a incidência e gravidade da doença nas culturas.
As análises de resistência a produtos fitossanitários realizadas por laboratórios especializados são ferramentas valiosas na gestão e controlo de agentes patogénicos como a Botrytis cinerea na agricultura. Análises de resistência como as realizadas no Laboratório ZeriMar fornecem informações cruciais sobre a sensibilidade das populações de agentes patogénicos a diferentes fungicidas, permitindo aos agricultores, técnicos e agrónomos desenvolver estratégias de gestão mais eficazes e sustentáveis para proteger a saúde das plantas e garantir a produção .
# # # Conclusão # # #
A Botrytis cinerea representa uma ameaça constante à agricultura em todo o mundo, mas com uma gestão adequada e a implementação de medidas preventivas e de controlo, é possível reduzir o seu impacto e proteger a saúde das culturas. É essencial adotar uma abordagem integrada que combine práticas culturais, utilização de fungicidas, análise de resistência e utilização de agentes de biocontrolo para minimizar a propagação e os danos causados por este agente patogénico. Ao mesmo tempo, é importante continuar a investigar e a desenvolver novas ferramentas e tecnologias para a análise da resistência em Botrytis cinerea.
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